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        實驗用品的滅菌方法簡介!

        提供者:上海古朵生物科技有限公司   發布時間:2020/12/15  閱讀次數:88次   進入該公司店鋪我要詢價

        微生物實驗室常用的培養皿、三角瓶、吸管、試管、過濾器必須徹底滅菌,否則會影響實驗結果。

        、實驗用的滅菌

        1.高壓蒸氣滅菌。高壓蒸氣滅菌用121℃蒸氣壓力滅菌20-30min即可。高壓蒸氣滅菌后, 玻璃器皿上常常帶有水珠,可再用烘箱烘干。

        2.干熱滅菌干熱滅菌用烘箱。通常于150-160℃滅菌2小時。溫度不可過高,超過180℃時棉塞和紙張易烤焦起火。器皿放入烘箱之必須是干燥的,以免引起玻璃的破碎。器皿在烘箱內不宜過滿,應留有定的空隙。溫度應從室溫逐漸升至所需溫度。結束后也應逐步降溫直至低于60℃時才可開門取出滅菌的器皿,否則玻璃可能因突然遇冷而破碎。

        二、培養基的滅菌

        培養基的滅菌可用濕熱滅菌或過濾滅菌。濕熱滅菌有高壓蒸氣滅菌和常壓蒸氣滅菌兩種。

        (1)高壓蒸氣滅菌在高壓蒸氣滅菌器中進行,利用提高蒸氣壓力而使溫度增高的作用,因而提高了蒸氣滅菌效力。蒸氣壓力和溫度關系見表11-2。

        上表所列的溫度是飽和蒸氣壓力下的溫度。但如高壓蒸氣滅菌器中的空氣未排凈,那么實際溫度就達不到應有的溫度。例如,完全不排除滅菌器中的空氣,當表壓為1kg/cm2,實際溫度僅為100℃;如排除滅菌器中1/2的空氣,當表壓為1kg/cm2氣實際溫度僅為112℃。因此使用高壓蒸氣滅菌時務必將其中空氣全部排除,才能達到預期效果。般培養基滅菌時大多使用1kg/cm2,15~20·min。如滅菌器中裝填較滿、培養基裝量較大(1L以上)或培養基污染雜菌較多(如蚨皮)時,可適當延長滅菌時間達30min。個別情況下可用1 kg/cm2以上的蒸氣壓力滅菌。培養基中如含有高溫時易分解破壞的物質(如某些含糖培養基),可采用較低的壓力,如0.6~0.8kg/cm2。配制這種培養基時應盡量減少雜菌污染。所用的試管或三角瓶及其棉塞應先行滅菌。培養基中其他的耐熱成分也可先行高壓滅菌。加入不太耐熱組分,分裝后再用較低壓力滅菌。

        (2)常壓蒸氣滅菌也稱作間歇蒸氣滅菌,用于在100℃以上易千破壞的培養基的滅菌,如牛奶、明膠等。常壓蒸氣滅菌也就是用蒸氣蒸。在滅菌器中溫度升到100℃時,在不加壓力的情況下使水保持沸騰,即保持lOO℃30 min。取出滅菌的培養基,放室溫或保溫箱中。第二、三日連續如上法于100℃各滅菌30min即可。細菌的營養體可在可在第二日的100℃30min殺死。第三日再將少數殘留的細菌殺死,這樣可達到完全滅菌的目的。

        (3)過濾滅菌用于不能用熱滅菌的培養基, 如某些易破壞或易揮發的物質。常用的除去細菌的過濾器有賽氏過濾器和微孔膜過濾器。這兩種過濾器的形式大致相同,只是過濾板不同。過濾細菌用的賽氏過濾器的規格為EK,微孔膜的規格為0.22~0.45μm。使用,將過濾器連同吸濾瓶等按無菌操作的要求裝好,用紗布包好,高壓蒸氣滅菌。使用時用空泵抽氣吸濾,不可將漏斗中的液體抽干。使用過的濾板需棄去。有的微量物質,如指示劑顏色等可能被濾板吸附,從培養基中損失掉。賽氏過濾板尤其易吸附微量物質,使用時應注意。

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